|
Λεπτομέρειες:
|
| Όνομα προϊόντων: | Ligase DNA | 10299ES40: | U 40.000 |
|---|---|---|---|
| 10299ES42: | U 400.000 | 10299ES83: | U 1.600.000 |
| Τυφλοπόντικας DNA εισαγωγής (pmol): | DNA εισαγωγής (NG)/[0,66 μέσο μήκος DNA εισαγωγής × (σημείο ζέσεως)] | Εφαρμογή: | για την ερευνητική χρήση ΜΟΝΟ! |
| Υψηλό φως: | 400 Ligase DNA U/UL T4,Ligase ερευνητικού T4 DNA,T4 Ligase DNA βιοχημικό αντιδραστήριο |
||
Γρήγορο ligase DNA T4 (400 U/ΜL)
Γρήγορο Ligase DNA T4 είναι ένα ενιαίο ενζυμικό προϊόν που μπορεί να χρησιμοποιηθεί για να συνδέσει τα τεμάχια και τον προσαρμοστή DNA στο στάδιο της κατασκευής βιβλιοθηκών NGS. Το προϊόν έχει ελεγχθεί με την υψηλή αλληλοuχία ρυθμοαπόδοσης και έχει την άριστη ποιότητα. Αυτό το ένζυμο έχει μια ιδιαίτερα αποδοτική δυνατότητα επίδεσης, που είναι πολύ κατάλληλη για την επίδεση των σύνθετων τεμαχίων νουκλεϊνικού οξέος, όπως ο προσαρμοστής Ω της πλατφόρμας MGI. Συστήνεται να επιλεχτεί Ligation DNA Hieff NGSTM Ultima η ενότητα (Cat#12604) το της οποίας τμήμα πυρήνων είναι γρήγορο Ligase DNA T4 για τους πελάτες που δεν χρειάζονται τη ρύθμιση συστημάτων.
| Όνομα προϊόντων | Cat# | Μέγεθος |
| Γρήγορο Ligase DNA T4 (400 U/ΜL) | 10299ES40 | U 40.000 |
| 10299ES42 | U 400.000 | |
| 10299ES83 |
U 1.600.000 |
Περιγραφή προϊόντων για γρήγορο ligase DNA T4
Γρήγορο Ligase DNA T4 είναι ένα ενιαίο ενζυμικό προϊόν που μπορεί να χρησιμοποιηθεί για να συνδέσει τα τεμάχια και τον προσαρμοστή DNA στο στάδιο της κατασκευής βιβλιοθηκών NGS. Το προϊόν έχει ελεγχθεί με την υψηλή αλληλοuχία ρυθμοαπόδοσης και έχει την άριστη ποιότητα. Αυτό το ένζυμο έχει μια ιδιαίτερα αποδοτική δυνατότητα επίδεσης, που είναι πολύ κατάλληλη για την επίδεση των σύνθετων τεμαχίων νουκλεϊνικού οξέος, όπως ο προσαρμοστής Ω της πλατφόρμας MGI. Συστήνεται να επιλεχτεί Hieff NGSTMLigation DNA Ultima ενότητα (Cat#12604) το της οποίας τμήμα πυρήνων είναι γρήγορο Ligase DNA T4 για τους πελάτες που δεν χρειάζονται τη ρύθμιση συστημάτων.
Τμήματα προϊόντων γρήγορο ligase DNA T4
| Συστατικός αριθμός | Συστατικά | Cat#/Size | ||
| 10299ES40 | 10299ES42 | 10299ES83 | ||
| 10299-α | Γρήγορο Ligase DNA T4 (400 U/ΜL) | 100 µL | 1 μιλ. | 4 μιλ. |
| 10299-β | 10 Ligase DNA × T4 απομονωτής | 250 μL | 5 × 500 μL | 10 μιλ. |
Οδηγίες
1. Οι τρέχουσες εξαρτήσεις κατασκευής βιβλιοθηκών επικρατόντος DNA γενικά δεν καθαρίζονται μετά από την επισκευή τελών και την επεξεργασία α-παρακολούθησης, και εκτελούν άμεσα ligation προσαρμοστών. Παρακαλώ αναφερθείτε στην ακόλουθη προετοιμασία για το σύστημα αντίδρασης. Η δίνη λεπτομερώς, περιστροφή εν συντομία και επωάζει για 15 λ. σε 20°C.
| Συστατικά | Όγκος (μL) |
| DA-παρακολουθημένο DNA | 60 |
| 10 Ligase DNA × T4 απομονωτής | 10 |
| 50% ΓΟΜΦΟΣ 6000 | 10* |
| Προσαρμοστής DNA | Χ** |
| Γρήγορο Ligase DNA T4 (400 U/ΜL) | 15*** |
| ddH2Ο | Μέχρι 100 |
[Σημείωση]: Ο ΓΟΜΦΟΣ 6000 *50% δεν παρέχεται στην εξάρτηση, πρέπει να τον προετοιμάσετε από μόνοι σας.
** Αναφερθείτε στον ακόλουθο πίνακα για το ποσό προσαρμοστή.
*** Το ποσό γρήγορο Ligase DNA T4 χρησιμοποιούμενο μπορεί να προστεθεί 1-5 μL όπως απαιτείται.
2. Η ποιότητα και η συγκέντρωση των προσαρμοστών χρησιμοποιούμενων άμεσα έχουν επιπτώσεις ligation στην αποδοτικότητα και την παραγωγή βιβλιοθηκών. Πάρα πολλή χρήση προσαρμοστών μπορεί να παραγάγει περισσότερα dimers προσαρμοστών, ενώ η χαμηλότερη χρήση μπορεί να έχει επιπτώσεις ligation στην αποδοτικότητα και την παραγωγή βιβλιοθηκών. Ο ακόλουθος πίνακας απαριθμεί το συνιστώμενο ποσό προσαρμοστή που χρησιμοποιείται στις διαφορετικές καταστάσεις DNA εισαγωγής χρησιμοποιώντας αυτήν την εξάρτηση.
| DNA εισαγωγής |
Προσαρμοστής: DNA εισαγωγής (μοριακή αναλογία) |
DNA εισαγωγής |
Προσαρμοστής: DNA εισαγωγής (μοριακή αναλογία) |
| 1 μg | 10:1 | 50 NG | 100:1 |
| 500 NG | 20:1 | 25 NG | 200:1 |
| 250 NG | 40:1 | 1 NG | 200:1 |
| 100 NG | 100:1 | PG 500 | 400:1 |
[Σημείωση]: DNA εισαγωγής ≈ τυφλοπόντικων DNA εισαγωγής (pmol) (NG)/[0,66 μέσο μήκος DNA εισαγωγής × (σημείο ζέσεως)].
Βήμα 1: Υπολογίστε τον αριθμό τυφλοπόντικων του DNA εισαγωγής. Τύπος: DNA εισαγωγής ≈ τυφλοπόντικων DNA εισαγωγής (pmol) (NG)/[0,66 μέσο μήκος DNA εισαγωγής × (σημείο ζέσεως)] Τυφλοπόντικας DNA εισαγωγής (pmol) =100 ÷ (0.66×300) = 0,5 pmol
Βήμα 2: Σύμφωνα με τον ανωτέρω πίνακα, υπολογίστε τον αριθμό τυφλοπόντικων του προσαρμοστή προστιθέμενο. Όταν το DNA εισαγωγής είναι 100ng, η μοριακή αναλογία των προσαρμοστών: το DNA εισαγωγής είναι 100:1, και ο αριθμός τυφλοπόντικων του pmol προσαρμοστών added=100×0.5 pmol=50
Βήμα 3: Υπολογίστε τον όγκο προσθηκών προσαρμοστών. Η συγκέντρωση προσαρμοστών = 15 μmol/L (εάν χρησιμοποιείτε τον προσαρμοστή άλλης επιχείρησης, εσείς πρέπει να καθορίσει τη συγκέντρωσή της σύμφωνα με τις οδηγίες της) Ο όγκος του προσαρμοστή πρόσθεσε = τυφλοπόντικες προστιθέμενης της προσαρμοστής (pmol 50) συγκέντρωσης ÷ του προσαρμοστή (15 μmol/L) = 3,34 μL (σημείωση: 15 μmol/L = 15 pmol/μL)
Εν περιλήψει, ο όγκος στον οποίο ο προσαρμοστής μπορεί να προστεθεί είναι 3,4 μL. (Σημείωση: Ο μέγιστος όγκος προσθηκών του προσαρμοστή δεν υπερβαίνει 5 μL).
Το προϊόν στέλνεται με τα πακέτα πάγου και μπορεί να αποθηκευτεί σε -20°C για δύο έτη.
Καθορισμός μονάδων
Σε ένα ligation 20 μL σύστημα αντίδρασης, όταν αντιδριούνται 6 μgⅢ λDNA-οπίσθιου σε 16℃ για 30 mins, το ποσό ενζύμου που απαιτήθηκε για να δώσει περισσότερο από 50% ligation των τεμαχίων DNA ορίστηκε ως μια μονάδα (U).
Προσοχές
1. T4 Ligase DNA είναι ευαίσθητο στη φυσική αλλοίωση. Κατά τη μίξη, αναστρέψτε ήπια το σωλήνα και το κούνημα καλά. Μην τινάξτε σθεναρά
2. Τα ένζυμα πρέπει να αποθηκευτούν σε ένα παγοκιβώτιο ή σε ένα λουτρό πάγου όταν χρησιμοποιείται, και πρέπει να αποθηκευτούν στη μεταγενέστερη χρήση -20°C αμέσως
3. Αυτό το προϊόν είναι για την ερευνητική χρήση ΜΟΝΟ!
4. Για τη Ασφάλεια και Υγεία σας, παρακαλώ φορέστε τα παλτά εργαστηρίων και τα μίας χρήσης γάντια για τη λειτουργία.
Εάν χρειάζεστε περισσότερες πληροφορίες για αυτό το γρήγορο ligase DNA T4 (400 U/ΜL), παρακαλώ απευθυνθείτε με μας, σας ευχαριστεί
Υπεύθυνος Επικοινωνίας: Ms Kris
Τηλ.:: +8613049739311
